肺炎

肺炎(pneumonia)是指终末气道、肺泡和肺间质的炎症.可由病原微生物、免疫损伤、理化因素、过敏及药物等因素所致.主要临床症状为发热、咳嗽咳痰.部分可发展为重型肺炎出现循环、呼吸衰竭而危及生命。肺炎动物模型根据肺炎病原学可分为细菌性、真菌性、病毒性、衣原体支原体性、脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导性、化学诱导性等多种类型.其中使用细菌建模的方法较常用。

LPS在机体内可诱发炎症细胞浸润、炎症因子释放，引起的炎症损伤与G-菌真实感染相似，最初用于构建急性肺损伤的动物模型，后逐渐被广泛用于建立肺炎动物模型。

造模材料：

Wistar大鼠，雄性，体重为180g-220g，LPS，手术器材

造模过程：

将大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾静脉后，按压住尾静脉1/3处，注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理盐水，给药剂量10mg/kg），从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作，但向尾静脉注射等体积的生理盐水。

模型验证：

1.肺损伤后的大体观察：肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。

2.肺的湿/干重比：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。

3.肺损伤后的组织病理观察 ：取左肺4%多聚甲醛固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm），HE染色。HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度，ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出，肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤，评估肺部损伤分布情况；而高倍镜下则可以对肺泡结构进行辨认，对肺损伤程度进行评估和评分。

4.标志性炎症因子表达水平的检测：左肺叶气管解剖，行支气管插管，预冷的(4度)无菌生理盐水l ml进行支气管肺泡灌洗3次，共3 m1，回收支气管肺泡灌洗液(BALF)至无菌离心管中， 1500 r／min，离心10 min，收集上清液，-80℃保存,使用ELISA试剂盒检测肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-1β等细胞因子的含量。

交付流程：

前期沟通→方案评估→方案接收→支付预付款→项目进行→支付尾款→项目交付