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肺炎
肺炎(pneumonia)是指终末气道、肺泡和肺间质的炎症.可由病原微生物、免疫损伤、理化因素、过敏及药物等因素所致.主要临床症状为发热、咳嗽咳痰.部分可发展为重型肺炎出现循环、呼吸衰竭而危及生命。肺炎动物模型根据肺炎病原学可分为细菌性、真菌性、病毒性、衣原体支原体性、脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导性、化学诱导性等多种类型.其中使用细菌建模的方法较常用。
LPS在机体内可诱发炎症细胞浸润、炎症因子释放,引起的炎症损伤与G-菌真实感染相似,最初用于构建急性肺损伤的动物模型,后逐渐被广泛用于建立肺炎动物模型。
造模材料:
Wistar大鼠,雄性,体重为180g-220g,LPS,手术器材
造模过程:
将大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾静脉后,按压住尾静脉1/3处,注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理盐水,给药剂量10mg/kg),从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作,但向尾静脉注射等体积的生理盐水。
模型验证:
1.肺损伤后的大体观察:肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出,可以直观的反映肺损伤程度。
2.肺的湿/干重比:肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标,也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。
3.肺损伤后的组织病理观察 :取左肺4%多聚甲醛固定,然后将肺组织常规脱水,石蜡包埋,切片(厚度为5μm),HE染色。HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度,ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出,肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤,评估肺部损伤分布情况;而高倍镜下则可以对肺泡结构进行辨认,对肺损伤程度进行评估和评分。
4.标志性炎症因子表达水平的检测:左肺叶气管解剖,行支气管插管,预冷的(4度)无菌生理盐水l ml进行支气管肺泡灌洗3次,共3 m1,回收支气管肺泡灌洗液(BALF)至无菌离心管中, 1500 r/min,离心10 min,收集上清液,-80℃保存,使用ELISA试剂盒检测肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-1β等细胞因子的含量。
交付流程:
前期沟通→方案评估→方案接收→支付预付款→项目进行→支付尾款→项目交付