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肺间质纤维化
博来霉素(bleomycin)是一种多肽类抗肿瘤药物,其导致肺间质纤维化的机制主要是通过活性氧的作用。在博来霉素致肺损伤的早期,即肺泡炎阶段,产生大量氧自由基,对肺造成损伤。
造模过程:
1.大鼠:选用体重170~200g的Sprague Dawley大鼠。博来霉素(30mg/支),用0.9%氯化钠稀释成4g/L,气管内滴入博来霉素溶液0.25~0.3ml(5mg/kg),可建立肺间质纤维化模型。以2%戊巴比妥钠(40mg/200g,即0.25ml/只)腹腔麻醉大鼠,约3~5分钟后,大鼠进入麻醉迟缓状态。麻醉后将其仰卧固定于鼠板,将四肢和头部固定,剪去颈毛。用碘伏消毒皮肤,在无菌操作下切开长约1cm的颈中切口,逐层分离暴露气管(若室温低,须用保温措施)。用眼科钳经气管下方穿过,轻微抬起气管,尽量接过气管分叉处,抬高鼠板头端,使与桌面成30°~35°。选择1个7号的注射用针头,将针头用砂片磨成弧形,使其变得圆钝。在进针前用注射器试通注射针头,避免堵塞。进针时与水平面成150°,在两个环状软骨之间刺入。针孔方向面向术者,有落空感证明已刺进1~1.5cm,约到气管分叉处停止进针后注入博来霉素。注入博来霉素0.2ml(约4mg/kg),再向气管内注入0.2ml的空气2~3次,使药物在肺部分布均匀。以大鼠身体长轴为中心,正反快速旋转鼠板1~2分钟。缝合皮肤,局部碘伏消毒(或用青霉素消毒)防止感染,室温保持在24~25℃,待动物自然清醒后置笼内常规饲养。
2.小鼠:选用体重18~20g的雄性C57BL/6小鼠(或BALB/c小鼠)。将实验动物麻醉后仰卧,纵行切开皮肤,钝性分离暴露气管,用4号针头刺入气管,尽量接近气管分叉处,将0.05mL博来霉素缓慢滴入(博来霉素每支8mg,用前以生理盐水配制成0.2%药液),立即将动物直立旋转,使药液在肺内均匀分布,然后缝合皮肤,局部乙醇消毒防止感染。
模型验证:
进行肺组织病理学检查,肺泡炎评分,肺纤维化评分
交付流程:
前期沟通→方案评估→方案接收→支付预付款→项目进行→支付尾款→项目交付